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2015-11-09 2016-10-26 2016-03-04 小鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員17（TNFRSF17）試劑盒
2014-12-29 2014-11-07 產(chǎn)品展示/ Product display
NCI-H82 (人小細胞肺癌細胞)原始腫瘤的形態(tài)學不符合小細胞肺癌（SCLC）的特征。該細胞系在生化和形態(tài)學上是SCLC的變種，表達神經(jīng)元特異性烯醇酶和肌酸激酶的腦同工酶。
產(chǎn)品型號：廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家更新時間：2025-04-15訪 問 量：594
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聯(lián)系電話：15221858802
| 品牌 | 信裕生物 | 純度 | 99.99% |
|---|---|---|---|
| 貨號 | XY-H573 | 規(guī)格 | 1*10^6cells/T25方瓶 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 主要用途 | 僅用于科研 |
| 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁 |
NCI-H82 (人小細胞肺癌細胞)
一、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | NCI-H82（人小細胞肺癌細胞） |
細胞別稱 | NCI-H82 [H82] |
商品貨號 | XY-H573 |
種屬來源 | 人 |
年齡性別 | 男性 |
組織來源 | 來源于轉(zhuǎn)移灶：胸腔積液 |
生長特性 | 懸浮成團 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
細胞描述 | 原始腫瘤的形態(tài)學不符合小細胞肺癌（SCLC）的特征。該細胞系在生化和形態(tài)學上是SCLC的變種，表達神經(jīng)元特異性烯醇酶和肌酸激酶的腦同工酶。它的L-DOPA脫羧酶或蛙皮素的表達量未達到可檢測水平。該細胞產(chǎn)生一個異常大小的p53 mRNA（3.7 kb）。該細胞的C-myc DNA序列擴增約25倍，c-myc RNA比正常細胞增加24倍。據(jù)報道該細胞表達功能性ANP受體，但用ANP處理不會改變其生長方式。該細胞的神經(jīng)絲和波形蛋白染色呈陽性，表達v-fes，v-fms，Ha-ras，Ki-ras，N-ras和c-raf 1 mRNA。經(jīng)本庫STR檢測無誤，STR鑒定結果為： Amelogenin: X ,CSF1PO: 11,11, D13S317: 8,8, D16S539: 12,12,D5S818: 12,12, D7S820: 10,13,TH01: 9,9.3,TPOX: 11,11,vWA: 14,14 |
生物安全等級 | 1 |
細胞規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 |
支原體檢測 | 無 |
培養(yǎng)基 | RPMI-1640 87%+ 優(yōu)質(zhì)胎牛血清 10%+GlutaMAX-1谷氨酰胺 1%+Sodium Pyruvate丙酮酸鈉1%+P/S青霉素-鏈霉素 1% |
培養(yǎng)條件 | 氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 |
傳代比例 | 1:2 |
換液頻率 | 2~3次/周 |
二、細胞培養(yǎng)操作
1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤? cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
b、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
c、棄上清，沉淀細胞用12ml培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，最后放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
d、待細胞貼壁后，觀察培養(yǎng)結果，之后進行換液培養(yǎng)或傳代。
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
b、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
c、用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
d、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
三、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
僅用于科研，不能用于臨床診斷！所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于人或動物的治療等任何其他用途，不為任何個人提供產(chǎn)品和服務。以實際收貨產(chǎn)品說明書為準，網(wǎng)站說明書僅供參考。
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